Semaglutid aralashmalari

Semaglutid aralashmalari|Simeglutid nopokligini nazorat qilish|Nopoklikning maxsus sintezi va tuzilishini tasdiqlash|Fan-Peptid

Soma Lutide (Simeglutide) ifloslik nazorati - uchun GLP-1 dori sifatini oʻrganish, umumiy dori topshirish. Ilm-Peptid Soma Lutide bilan bogʻliq aralashmalar, jumladan, etishmayotgan peptidlar, oksidlangan aralashmalar, yogʻ kislotasi eksfoliatsiyasi mahsulotlari, PEGur.com bilan bogʻliq aralashmalarning maxsus sintezini taʼminlaydi. tuzilmaviy tasdiqlash ma'lumotlari. Biz sizning nopoklik profilingizni o'rganishni qo'llab-quvvatlay olamiz. Biz bilan bog'lanish uchun xush kelibsiz.

Semaglutid (shuningdek, Semaglutide sifatida ham tanilgan) bu yillarda yonib ketdi. Novo Nordisk bozor qiymatini dunyodagi ikkinchi, mahalliy peptid generik ishlab chiqaruvchilari darajasiga ko'tarish uchun unga tayanadi, deyarli hech kim unga qaramaydi. Og'zaki dozalash shakli va in'ektsiya shakli - bularning barchasi katta bozorlardir. Patentning amal qilish muddati tugagandan so'ng, kim birinchi navbatda sifatli tadqiqotni amalga oshirishi mumkin, kim birinchi generikni qo'lga kiritish imkoniyatiga ega bo'ladi.

 

Biroq, somatostatinni sifatli o'rganish, ochig'ini aytganda, ko'plab peptidlarga qaraganda qiyinroq. Bu yog 'kislotalari zanjiri (oktadekandioik kislota) va PEG bog'lovchisi bo'lgan 31{3}}peptiddir. Ushbu tuzilma uning nopoklik spektrini aniqlaydi, ayniqsa boy - etishmayotgan peptidlar, oksidlangan aralashmalar, yog 'kislotalarini to'kish mahsulotlari, PEG zanjiri bilan bog'liq aralashmalar, dimerlarning har biri nazoratga ega bo'lishi kerak, har biri aniq bo'lishi kerak. Ayniqsa, oddiy peptidlarda topilmaydigan PEG zanjiri faqat Somalutidga xosdir.

 

Biz murakkab peptid aralashmalarini sintez qilishda katta tajriba to'pladik. Biz somatostatinni o'rganishga ixtisoslashganmiz va uning nopoklik profilida qanday qiyinchiliklar borligini va asosiy nazorat elementlari nima ekanligini bilamiz. Biz turli xil Semaglutid aralashmalari sintezini sizning ehtiyojlaringizga ko'ra, tizimli tasdiqlash ma'lumotlari bilan sozlashimiz va usulni o'rnatishga yordam berishimiz mumkin, shunda ariza topshirishda sizga qo'shimcha berilishi ehtimoli kamroq bo'ladi.

Somatostatinning molekulyar tuzilishi uning nopoklik profilining oddiy peptidlarga qaraganda ancha murakkab ekanligini aniqlaydi. Nopoklikni o'rganishda biz asosan ushbu toifalarga e'tibor qaratamiz:

Peptid etishmayotgan
Sintez jarayonida o'tkazib yuborilgan 31 ta aminokislotalar nopoklikdir. HPLCda etishmayotgan peptidlarni saqlash vaqtlari keng tarqalgan bo'lib, etishmayotgan peptidlarning turli xil pozitsiyalarida turli xil qutblanishlari mavjud. Ba'zilari N-terminusda, ba'zilari o'rtada, ba'zilari esa yog' kislotasi biriktiriladigan joy yaqinida yo'q. Biz mijozdan turli pozitsiyalarda etishmayotgan o'nlab peptidlarni so'ragan holda, ularning jarayonida barcha mumkin bo'lgan etishmayotgan aralashmalarni topish uchun buyurtma oldik.

Oksidlovchi aralashmalar
Somalutid o'z ketma-ketligida metioninga (Met) ega bo'lib, u sulfoksidga, keyin esa sulfonga oksidlanishga moyil. Oksidlangan aralashmalar ko'pincha barqarorlik tadqiqotlarida paydo bo'ladi va ma'lum vaqtdan keyin o'sadi. Biz taqqoslash qildik, bir oy davomida tezlashtirilgan sharoitda oksidlanish cho'qqisi nazoratsiz 0,3% dan oshib ketishi mumkin.

Yog 'kislotalarini to'kish mahsulotlari
Somatostatinning yog 'kislotasi yon zanjiri (oktadekandioik kislota) lizinga bog'lovchi orqali biriktiriladi va bu modifikatsiya sintez yoki saqlash vaqtida qisman to'kilishi mumkin. Eng muammoli tomoni shundaki, to'kilish yog' kislotasi va bog'lovchi o'rtasida va bog'lovchi va peptid - o'rtasida turli joylarda - sodir bo'lishi mumkin, natijada turli aralashmalar paydo bo'ladi. Biz mijozlarimiz uchun yog 'kislotalariga tegishli-bir nechta aralashmalarni sintez qildik, ular to'liq to'kilib ketishidan tortib, kichik bir qismigacha.

PEG zanjiri{0}} bilan bog'liq aralashmalar
Bu somatostatindagi nopoklikning eng o'ziga xos turi. U PEG (polietilen glikol) bog'lovchisiga ega va PEG zanjiri sintez jarayonida sinishi, qisqarishi yoki polimerlanishi mumkin, natijada bir qator tegishli aralashmalar paydo bo'ladi. Ushbu aralashmalar oddiy peptidlarda topilmaydi, lekin faqat somatostatinga xosdir va sifatli tadqiqotlarda o'rganish qiyin. Biz PEG zanjirini yo'q qilish, PEG zanjirini qisqartirish va PEG zanjiri oksidlanishining turli xil variantlarini yaratdik.

Dimerlar/polimerlar
Ikki yoki undan ortiq somatostatin molekulalari to'planib, dimer yoki undan yuqori hosil qiladi. Dimerning molekulyar og'irligi asosiy cho'qqiga nisbatan ikki baravar ko'pdir va u ko'pincha HPLCda keng cho'qqi hisoblanadi, shuning uchun uni nazorat sifatida ishlatishdan oldin uni maxsus ajratish va tozalash kerak. Biz dimerlarni tayyorlashni amalga oshirdik va 95% dan ortiq tozalikka erishish uchun bir necha marta tozalash kerak bo'ldi.

Deaminatsiyalangan aralashmalar
Asparagin (Asn) va glutamin (Gln) kislotali yoki isitish sharoitida osongina deamidlanadi, natijada izomerlar paydo bo'ladi. Somatostatin ketma-ketligida bir nechta Asn va Gln mavjud va deamidizatsiya nopokligi ko'pincha majburiy degradatsiya testida paydo bo'ladi, shuning uchun nopoklikni aniqlash uchun nazorat mahsulotidan foydalanish kerak.

Diastereoizomerlar
Uzoq zanjirli sintez jarayonida individual aminokislotalar rasemizatsiyaga uchraydi, natijada diastereoizomerlar paydo bo'ladi. Bunday nopoklikning tarkibi odatda yuqori emas, lekin ekspertlar deklaratsiya qilishda so'rashadi va tasdiqlash uchun nazorat mahsulotiga ega bo'lish yaxshiroqdir.

Ushbu aralashmalarning ko'pchiligini sotib olish mumkin emas va ularni maxsus sintez qilish kerak. Biz allaqachon yuqoridagi barcha toifalarni qamrab olgan somatostatin aralashmalarini sozlash bo'yicha ko'plab loyihalarni amalga oshirdik.

Peptidlar seriyasini yo'q qilish
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, MS va NMR tasdiqlash bilan. Biz N-terminaldan C-terminalgacha 5 aminokislota oralig'iga ega peptidlar to'plamini sintez qildik.

Oksidlovchi aralashmalar
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95% va oksidlanish darajasini tasdiqlash uchun LC-MS spektrini taqdim etishimiz mumkin. Sulfoksid va sulfon HPLC tomonidan ajratiladi va biz ikkalasini ham qila olamiz.

Yog 'kislotalarini to'kish mahsulotlari
Bu Somalutid aralashmalarining asosiy yo'nalishi. Yog 'kislotalari zanjiri to'liq yoki qisman bo'shatilishi mumkin. Biz to'kishning turli pozitsiyalari uchun bir qator variantlarni sintez qilishimiz mumkin. Biz amalga oshirgan eng murakkab loyihalardan birida, mijoz bizdan yog 'kislotasi zanjirida etishmayotgan 6 ta uglerod bilan nopoklikni sintez qilishni so'radi va buni to'g'ri qabul qilish uchun bizga ikki oy kerak bo'ldi.

PEG zanjiri{0}} bilan bog'liq aralashmalar
Bu somatostatinning eng qiyin aralashmalaridan biri va bu bizning kuchimizdir. PEG zanjiri etishmayotgan, qisqartirilgan, singan, oksidlangan va turli xil variantlar ishlab chiqarilishi mumkin. Biz nopoklikni PEG zanjiri butunlay yo'qolgan (ya'ni de-PEGillangan somatostatin), PEG zanjiri uzunligi ikki baravar qisqartirilgan va PEG zanjiri bo'lgan mahsulot oksidlangan holda qildik. Buyurtmachiga ushbu nazoratlar berildi va PEG{6}}bo'lgan nopoklik spektri to'liq aniqlandi.

Dimer
O'zaro{0}}bog'lanish yoki kovalent bo'lmagan o'zaro ta'sirlar natijasida hosil bo'lgan dimerlar turli usullar bilan tayyorlanishi va yuqori tozalik nazoratini ta'minlash uchun izolyatsiya qilinishi va tozalanishi mumkin. Dimerlarni tozalash juda mashaqqatli, ammo biz monomerlarni qanday ajratishni bilish tajribasiga egamiz.

Deaminatsiyalangan aralashmalar
Ketma-ketlikdagi Asn va Gln saytlari uchun biz majburiy degradatsiya yoki maqsadli sintez yo'li bilan deamidatsiyalangan nopoklik nazoratini tayyorlashimiz mumkin. Deamidatsiyadan so'ng molekulyar og'irlikdagi farq faqat 1 ni tashkil qiladi, bu MS bilan ajralib turish oson emas, shuning uchun biz odatda tasdiqlash uchun NMR yoki maxsus xromatografik sharoitlardan foydalanamiz.

Dther moslashtirilgan aralashmalar
Agar tadqiqotingizda yangi noma'lum nopoklikni topsangiz, strukturani tahlil qilish va uni sintez qilishda sizga yordam bera olamiz. Bizga namunani yuboring, biz LC{1}}MS tahlilini o‘tkazamiz, tuzilmani taxmin qilamiz, so‘ngra yo‘nalishli sintez qilamiz, so‘ngra kelishuvni tasdiqlash uchun saqlash vaqti va massa spektrini solishtiramiz. Biz bu jarayonni ko'p marta qildik va muvaffaqiyat darajasi ancha yuqori.

Analitik usulni ishlab chiqish va tasdiqlash
HPLC yoki LC-MS usulini o'rnatishda mahalliylashtirish, ajratishni aniqlash, chiziqli diapazonni tekshirish va qayta tiklash uchun nopoklik nazorati talab qilinadi. Tekshirish bo'lmasa, usulni tekshirishda bir qism etishmayapti. Ko'pgina mijozlar bizdan usulni o'rnatish uchun birinchi navbatda bir nechta asosiy nopokliklarni bajarishimizni so'rashadi, keyin esa qolgan qismini asta-sekin tashkil qiladi.

Geterogen massa spektrometriyasi
Umumiy dori deklaratsiyasida texnologik aralashmalar va degradatsiya mahsulotlarining har tomonlama sifatli va miqdoriy tahlili talab qilinadi. Har bir nopoklikning joylashuvi, tarkibi va tuzilishi nazorat mahsuloti bilan tasdiqlanishi kerak. Biz ma'lumotlarning deklaratsiyasini to'ldirish uchun yuborilganini ko'rdik, o'ndan to'qqiz marta bu parchaning nopokliklarini tushunmadik.

Barqarorlik tadqiqotlari
Uzoq{0}}muddatli barqarorlik va tezlashtirilgan testlarda qaysi degradatsiya mahsulotlari ustun ekanligini va kontentdagi tendentsiyani aniqlash kerak. Nopoklik nazorati yordamida aniq miqdorni aniqlash va nazorat qilish mumkin. Xaridor somatostatinni tayyorlashning barqarorligini ta'minladi va tezlashtirilgan sharoitlarda buzilish cho'qqisi tez o'sib borishini aniqladi, shuning uchun biz uni MS tomonidan tahlil qildik va strukturani tasdiqlash uchun sintez qildik, keyin mijoz bu haqda xabar berishdan yengil tortdi.

To'plamni chiqarish testi
Tijoriylashtirilgandan so'ng, API yoki formulaning har bir partiyasi ko'rib chiqilayotgan modda uchun sinovdan o'tkazilishi kerak. Nopoklikni nazorat qilish - bu chiqarishni tekshirish uchun muhim vosita.

Umumiy dori deklaratsiyasi haqida ma'lumot
Nopoklikni o'rganish - bu fayl ma'lumotlarining asosiy qismidir. To'liq nopoklik profilini va nazorat ma'lumotlarini taqdim etish ko'rib chiqishni chiqarish xavfini sezilarli darajada kamaytiradi.

1-holat: Farmatsevtika kompaniyasi, Somalutide umumiy dori dasturi
Ular somatostatinning umumiy versiyasini ishlab chiqmoqdalar va usulni tekshirish uchun nopoklikni nazorat qilishning to'liq to'plami kerak. Biz ular uchun 15 ta aralashmani moslashtirdik: 6 ta etishmayotgan peptidlar, 2 ta oksidlangan aralashmalar, 1 ta dimer, 2 ta yog 'kislotasi eksfoliatsiyasi mahsuloti, 3 ta PEG zanjiri bilan bog'liq aralashmalar va 1 ta deamidatsiya nopokligi. Har birining tozaligi MS va NMR ma'lumotlari bilan 95% dan yuqori edi. Loyiha menejeri shunday dedi: "Somalutidning nopokliklari boshqa peptidlarga, ayniqsa PEG peptidlariga qaraganda murakkabroq, biz bir qancha kompaniyalar qidirayotgan edik, ammo ularning barchasi buni qila olmasligini aytdi. Lekin siz hamma narsani qila oldingiz va ma'lumotlar to'liq edi, bu katta yordam bo'ldi ". Keyinchalik, ularning usulini tekshirish muvaffaqiyatli yakunlandi va ular hozirda topshirishga tayyorlanmoqda.

2-holat: CRO, PEG zanjiridagi aralashmalar bo'yicha maxsus tadqiqot
Ular somatostatin bo'yicha sifatli tadqiqot loyihasini amalga oshirdilar, bu PEG zanjiri bilan bog'liq aralashmalarni har tomonlama tahlil qilishni talab qildi. Biz tizimli ravishda PEG bilan bog'liq aralashmalarni sintez qildik{1}}: PEG zanjirining to'liq yo'qligi, PEG zanjiri uzunligining ikki baravar qisqarishi, PEG zanjiri uchlarining oksidlanishi va PEG zanjirining ikki qismga bo'linishi. jami 8 ta PEG{4}}bog'liq aralashmalarni sintez qildi. Mijoz ushbu boshqaruv vositalaridan PEG nopoklikni aniqlash usulining to'liq to'plamini yaratish uchun foydalangan, bu esa ularning taqdim etish ma'lumotlarining diqqatga sazovor joyiga aylandi.

3-holat: Barqarorlik tadqiqotlari, biotexnologiya kompaniyasi
Ular somatostatin formulasining barqarorligini o'rganishdi va degradatsiya mahsulotining tarkibi tezlashtirilgan sharoitlarda tez ortib borishini aniqladilar, ammo ular nima ekanligini bilishmadi. Biz namunani LC-MS tomonidan tahlil qildik, bu ma'lum bir joyda yog 'kislotasini to'kadigan nopoklik deb taxmin qildik va keyin uni maqsadli tarzda sintez qildik va taqqoslash orqali tasdiqladik. Ular ushbu nazorat yordamida tahlilni o'rnatdilar va bu degradatsiya mahsulotining tendentsiyasini aniq kuzatib bordilar. Keyinchalik, hisobotni topshirishda, ma'lumotlarning ushbu qismi mutaxassislar tomonidan ta'kidlangan va aniq ma'lumotlar tufayli hech qanday kompensatsiya berilmagan.

Somatostatin juda mashhur mahsulotdir, ammo nopoklikni o'rganish nozik ishdir, ayniqsa PEG zanjiri bilan bog'liq aralashmalar va yog 'kislotalari eksfoliatsiyasi mahsulotlari, ko'plab ishlab chiqaruvchilar buni uddalay olmaydi. Agar siz sifatli tadqiqot yoki somatostatinni umumiy ishlab chiqish bilan shug'ullanayotgan bo'lsangiz va nopoklik nazoratiga muhtoj bo'lsangiz, biz bilan gaplashishga xush kelibsiz. Biz juda ko'p ish qildik, qanday qiyinchiliklar borligini bilamiz va uni qanday hal qilishni bilamiz.